96孔熒光定量PCR儀已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的必備工具，但對(duì)于基因表達(dá)分析、基因分型研究（SNP/CNV）、病原體檢測(cè)、核酸藥物開發(fā)、測(cè)序文庫定量、作物育種等細(xì)分領(lǐng)域，依然存在更高通量的熒光定量檢測(cè)需求。
為此，酷搏科技于2023年夏天推出全新產(chǎn)品——Quantagene q900系列384孔熒光定量PCR系統(tǒng)，以更全面的功能、更快速的檢測(cè)、更準(zhǔn)確的定量結(jié)果助力用戶更高效的實(shí)驗(yàn)室研究。
產(chǎn)品特點(diǎn)
一臺(tái)優(yōu)秀的熒光定量PCR儀，需要在運(yùn)行快速、操作簡便的基礎(chǔ)上最大程度實(shí)現(xiàn)每個(gè)反應(yīng)孔溫度、光學(xué)性能的一致，從而得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。
為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，q900的熱循環(huán)系統(tǒng)設(shè)計(jì)了3組獨(dú)立輸出的Peltier模塊，分別對(duì)加熱模塊的 3個(gè)區(qū)域獨(dú)立控制，確保不同區(qū)域間的溫度均一性。
反應(yīng)體積5µl，全部384孔使用完全一致的反應(yīng)溶液時(shí)Tm值的分布。圖中Tm最大與最小值之差為0.18°C，Tm平均值為80.52°C。
另一方面，q900 采用獨(dú)特的雙重反射靜態(tài)光學(xué)模組陣列技術(shù)。每個(gè)光學(xué)通道配置獨(dú)立的長壽命 LED光源、濾光片組和CMOS相機(jī)，雙重反射的設(shè)計(jì)在小體積的機(jī)身中延長光路，降低孔板中心和邊緣的熒光信號(hào)差異。
左：在q900MX上使用四種探針（藍(lán)色：FAM，綠色：HEX，黃色：ROX，紅色：Cy5）分別進(jìn)行7個(gè)濃度10個(gè)梯度稀釋（n=6）的一步法四重RT-qPCR實(shí)驗(yàn)。右：雙重反射靜態(tài)光學(xué)模組陣列結(jié)構(gòu)示意圖。
性能展示
優(yōu)秀的384孔整板Ct一致性
得益于均一的熱循環(huán)系統(tǒng)和穩(wěn)定的光學(xué)系統(tǒng)，q900可以輕松實(shí)現(xiàn)整板Ct標(biāo)準(zhǔn)差小于0.05，有效消除邊緣效應(yīng)，在任何孔位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)都可以獲得相同的準(zhǔn)確結(jié)果。
大范圍濃度精準(zhǔn)定量
q900可以在100-1010拷貝/反應(yīng)范圍內(nèi)進(jìn)行定量檢測(cè)，穩(wěn)定均一的溫控系統(tǒng)確保全濃度范圍高效擴(kuò)增，為文庫定量、基因表達(dá)定量等應(yīng)用提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)結(jié)果。
使用q225及q900進(jìn)行連續(xù)2倍梯度稀釋實(shí)驗(yàn)，反應(yīng)體積5 μl，每一濃度三個(gè)平行反應(yīng)。在Ct值為4-30的區(qū)間范圍內(nèi)，q900均可以進(jìn)行準(zhǔn)確定量，且結(jié)果與q225實(shí)驗(yàn)結(jié)果高度一致。
1-25μl反應(yīng)體積均可適配
考慮到操作方便性，q900推薦反應(yīng)體積為5-10μl。而對(duì)于樣本或試劑較為珍貴的情況，在q900上使用低至1μl的反應(yīng)體系，依然可以獲得相同準(zhǔn)確性的測(cè)試結(jié)果，配合擬合算法計(jì)算Ct值，使得相同反應(yīng)體系在不同反應(yīng)體積下可以獲得完全一致的Ct結(jié)果。
在一個(gè)384孔板內(nèi)分別使用20 μ l，10μl，5μl，2μl和1μl五種不同反應(yīng)體積（圖中不同顏色對(duì)應(yīng)不同體積），組分配比完全相同的反應(yīng)溶液，每個(gè)體積6個(gè)平行反應(yīng)時(shí)的歸一化擴(kuò)增曲線。
為此，酷搏科技于2023年夏天推出全新產(chǎn)品——Quantagene q900系列384孔熒光定量PCR系統(tǒng)，以更全面的功能、更快速的檢測(cè)、更準(zhǔn)確的定量結(jié)果助力用戶更高效的實(shí)驗(yàn)室研究。
產(chǎn)品特點(diǎn)
一臺(tái)優(yōu)秀的熒光定量PCR儀，需要在運(yùn)行快速、操作簡便的基礎(chǔ)上最大程度實(shí)現(xiàn)每個(gè)反應(yīng)孔溫度、光學(xué)性能的一致，從而得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。
為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，q900的熱循環(huán)系統(tǒng)設(shè)計(jì)了3組獨(dú)立輸出的Peltier模塊，分別對(duì)加熱模塊的 3個(gè)區(qū)域獨(dú)立控制，確保不同區(qū)域間的溫度均一性。
反應(yīng)體積5µl，全部384孔使用完全一致的反應(yīng)溶液時(shí)Tm值的分布。圖中Tm最大與最小值之差為0.18°C，Tm平均值為80.52°C。
另一方面，q900 采用獨(dú)特的雙重反射靜態(tài)光學(xué)模組陣列技術(shù)。每個(gè)光學(xué)通道配置獨(dú)立的長壽命 LED光源、濾光片組和CMOS相機(jī)，雙重反射的設(shè)計(jì)在小體積的機(jī)身中延長光路，降低孔板中心和邊緣的熒光信號(hào)差異。
性能展示
優(yōu)秀的384孔整板Ct一致性
得益于均一的熱循環(huán)系統(tǒng)和穩(wěn)定的光學(xué)系統(tǒng)，q900可以輕松實(shí)現(xiàn)整板Ct標(biāo)準(zhǔn)差小于0.05，有效消除邊緣效應(yīng)，在任何孔位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)都可以獲得相同的準(zhǔn)確結(jié)果。
| 實(shí)驗(yàn)一 | 實(shí)驗(yàn)二 | 實(shí)驗(yàn)三 | |
| 儀器編號(hào) | 1 | 2 | 3 |
| Ct平均值 | 17.775 | 17.783 | 17.580 |
| Ct 標(biāo)準(zhǔn)差 | 0.022 | 0.020 | 0.031 |
| Ct CV | 0.12% | 0.11% | 0.18% |
使用三臺(tái)不同的q900儀器進(jìn)行384孔整板實(shí)驗(yàn)的擴(kuò)增曲線圖
大范圍濃度精準(zhǔn)定量
q900可以在100-1010拷貝/反應(yīng)范圍內(nèi)進(jìn)行定量檢測(cè)，穩(wěn)定均一的溫控系統(tǒng)確保全濃度范圍高效擴(kuò)增，為文庫定量、基因表達(dá)定量等應(yīng)用提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)結(jié)果。
| 儀器型號(hào) | q225 | q900 |
| 擴(kuò)增效率 | 100.1% | 100.1% |
| R2 | 0.9996 | 0.9996 |
1-25μl反應(yīng)體積均可適配
考慮到操作方便性，q900推薦反應(yīng)體積為5-10μl。而對(duì)于樣本或試劑較為珍貴的情況，在q900上使用低至1μl的反應(yīng)體系，依然可以獲得相同準(zhǔn)確性的測(cè)試結(jié)果，配合擬合算法計(jì)算Ct值，使得相同反應(yīng)體系在不同反應(yīng)體積下可以獲得完全一致的Ct結(jié)果。
| 反應(yīng)體積 | Ct平均值 | Ct標(biāo)準(zhǔn)差 |
| 20μl | 17.918 | 0.050 |
| 10μl | 17.915 | 0.007 |
| 5μl | 17.933 | 0.009 |
| 2μl | 17.939 | 0.027 |
| 1μl | 17.954 | 0.026 |
